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A3人T淋巴白血病細胞 含STR鑒定
【中文縮寫】A3
【中文名稱】A3人T淋巴白血病細胞
【背景資料】 見細胞說明書
【產品來源】 細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國內外著名大學建系
"公司提供貼壁、半貼壁、懸浮、半懸浮、貼壁與懸浮混合等細胞特性,一般細胞培養PBS量是10%,如果出現細胞狀態不良情況,可以提高PBS量到15%,SHEE人永生化食管上皮細胞待細胞穩定后,調回PBS量10%,對于初次實驗者,一般細胞培養,都需要加入雙抗防止細胞污染,細胞匯合度達到90%,我們開始寄送,這樣可以保持細胞收到時,良好的細胞活力。
一、售前
上海青旗生物專業為國內科研提供高品質細胞和優質服務,QC檢測合格后發貨保證細胞狀態良好,發貨前保證質量。
二、售后
收到細胞7天內出現狀態不佳等情況請及時反饋,會有技術同步指導操作協助解決,如仍未養活免費重發。建議及時保種,有備無患!
三、細胞生長條件:
培養條件 GIBCO(培養基90% +10%FBS)
溫度 37℃
空氣條件 5% CO2,,95% AIR
傳代方法1:2傳代,2~3天換液
凍存條件90%FBS+10%DMSO
四、細胞收到后處理
細胞在培養瓶中培養至良好狀態后灌滿*培養液并封好瓶口是細胞運輸的zui好辦法。收到細胞回到自己的實驗室后,先打開外包裝,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內,嚴格無菌操作。鏡下觀察:未超過80%匯合度時,可將瓶裝的*培養液移入廢液缸中,原瓶(T25瓶)保留6-8ml*培養液,懸浮細胞需離心處理,放入37℃、5%CO2孵箱培養;超過80%匯合度時,根據情況傳代或者凍存,具體操作見細胞培養步驟。
五、細胞培養步驟
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入6cm皿中,加入約6ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1、貼壁細胞,傳代參考如下:
①. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
②. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
③. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
④. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
A3人T淋巴白血病細胞|A3細胞 含STR鑒定
2、懸浮細胞,傳代參考如下:
方法①:收集細胞,1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法②:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,進行離心收集,1000RPM條件下離心5分鐘,去除上清,按凍存數量加入血清及DMSO,凍存比例為90%FBS+10%DMSO。
剛收到細胞時,胎牛血清可以用15%培養兩三天,利于細胞盡快恢復狀態,細胞穩定后再調回10%即可
收到細胞后如細胞狀態不佳,或培養中遇到問題,煩請當天盡快聯系,以便處理。當天及時反饋細胞情況和細胞照片是售后跟蹤處理重要參考依據,請您務必重視。