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HCEC 人角膜上皮細胞|HCEC細胞 含STR鑒定
【中文縮寫】HCEC
【中文名稱】HCEC 人角膜上皮細胞【背景資料】 見細胞說明書
【產品來源】細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國內外著名大學建系
"公司提供貼壁、半貼壁、懸浮、半懸浮、貼壁與懸浮混合等細胞特性,一般細胞培養PBS量是10%,如果出現細胞狀態不良情況,可以提高PBS量到15%, HCEC 人角膜上皮細胞待細胞穩定后,調回PBS量10%,對于初次實驗者,一般細胞培養,都需要加入雙抗防止細胞污染,細胞匯合度達到90%,我們開始寄送,這樣可以保持細胞收到時,良好的細胞活力。
復蘇細胞注意事項:
1 收到細胞后當天換液,全部更換成客戶自己的新鮮培養基,放進培養箱,第二天再消化。
2 邊觀察邊消化,根據細胞的形態,終止消化時間,采取以半分鐘間隔吹打細胞邊緣,如可吹打下來,即終止消化??蛻裘鞅容^好的消化時間。
3 隨細胞有一份細胞操作說明書,請客戶仔細查看。
4 記得加1%雙抗,降低被污染的概率。另外盡早凍存留種,以備后用。
5 售后時間為一周,僅限于細胞本身的質量問題,而因乙方自己不當操作(不規范操作,消化過度,不加雙抗導致的污染等)導致的細胞問題不在售后范疇。
6 收到細胞后,如細胞狀態不佳,或培養中遇到問題,煩請當天盡快聯系,以便處理。當天及時反饋細胞情況和細胞照片是售后跟蹤處理重要的參考依據,請您務必重視。
7 剛收到細胞時,胎牛血清可以用15%培養兩三天,利于細胞盡快恢復狀態,細胞狀態穩定后,再調回10%即可。
(其中1,2條針對于貼壁細胞,懸浮細胞詳情請見細胞操作說明書)" P4
復蘇T25培養瓶(一瓶)或凍存1ml凍存管(兩支)
【產品規格】 1*10(6)
【安全級別】 1
【產品種屬】 人
【組織來源】 口腔
【細胞形態】 上皮細胞樣
【細胞特性】 貼壁
"細胞培養基的選擇和使用:
MEM:成分簡單,貼壁細胞shou選。
HCEC 人角膜上皮細胞|HCEC細胞 含STR鑒定
選擇上海青旗生物細胞有3個理由:
1、細胞狀態好,形態佳,易成活,是市面上比較好養的細胞之一;
2、物流迅速,復蘇好后發貨,次日就能到;
3、使用我司推薦的進口品牌血清進行培養實驗,效果更佳。
細胞培養小技巧:
1. 買細胞要去靠譜的地方買,比如 ATCC 或者青旗生物。一般上面會有針對細胞的介紹,這樣培養之前可以了解細胞正常生長的狀態圖、傳代、培養基的類型等。
2. 不管是買的細胞,還是別人惠贈的細胞,剛拿到手趕緊的做兩件事:檢測是否有支原體污染;迅速擴增凍存,凍存細胞復蘇后第二天*更換一次培養基。
3. 發現細胞有污染迅速處理掉,特別是當你養了很多種細胞時。細菌污染、真菌污染很容易發現,支原體污染的話,細胞會長的慢,可以買個支原體檢測的試劑盒定期檢測一下。
4. 不同細胞生長周期不同。有的生長很快,比如說 MDA-MB-231,傳代的時候取離心懸液的十分之一就已經足夠了。有的又是特別慢,比如 BT474,傳代是一分二,復蘇起始的時候兩周多才能長滿。這就需要要在培養細胞的過程中多多摸索。
5. 對于嬌弱的細胞,就得細心呵護。胰酶消化不能過久,吹得時候要輕柔,離心時候也要注意轉速和時間。每天都要去看一下細胞,肉眼觀察培養基狀況、顯微鏡下觀察細胞生長狀況。記住,是每天。
細胞培養常見問題及解決方法
問題 | 原因 | 解決方案 |
細胞生長緩慢 | 生長培養基使用不當 | 按照生產商的建議,使用相應的預熱生長培養基。 |
生長培養基中血清質量差 | 使用其他批次血清。 | |
傳代操作不當 | 按照生產商的建議消化時間及傳代比例進行操作。 | |
換液過于頻繁 | 降低換液頻率,參考生產商推薦的換液頻率。 | |
細胞傳代次數過多 | 使用傳代次數較少的健康細胞。 | |
細胞生長超過匯合狀態 | 哺乳動物細胞傳代應在細胞處于對數期、未達到匯合狀態時進行,建議細胞密度達 80-90%傳代。 | |
細胞被支原體污染 | 將細胞、培養基和試劑丟棄;新取一只凍存細胞,并且使用新的培養基和試劑。 | |
細胞復蘇存活率低 | 細胞凍存不當 | 新取一只凍存細胞,并儲存在液氮中。將細胞儲存在液氮中,直至復蘇。 |
自行制備的凍存細胞無活性 | 將細胞按照生產商推薦的密度凍存。 | |
制備凍存細胞時使用傳代次數少的細胞。 | ||
嚴格按照生產商推薦的操作程序凍存細胞。請注意本手冊推薦的冷凍程序是凍存細胞的一般流程,只能作為指導原則使用。 | ||
新取一只凍存細胞。 | ||
細胞復蘇方法不當 | 嚴格按照生產商推薦的操作程序復蘇細胞。請注意本手冊推薦的解凍程序是復蘇細胞的一般流程,只能作為指導原則使用。 | |
確保冷凍細胞解凍迅速,接種前用預熱的生長培養基緩慢稀釋細胞。 | ||
復蘇培養基使用不當 | 使用生產商推薦的培養基。確保培養基使用前已經預熱。 | |
細胞稀釋過度 | 按照生產商的建議,將解凍后的細胞高密度接種,以改善復蘇效果。 | |
處理細胞時動作不夠輕柔 | 凍存和復蘇過程對大多數細胞都會造成不利影 響。不要通過渦旋振蕩或者用力敲打培養瓶的方法使細胞脫落(培養昆蟲細胞時除外),也不要高速離心細胞。 | |
凍存液中所用保護劑在儲存過程中未避光 | 如果未避光儲存,凍存保護劑會轉變為對細胞有毒性的物質;新取一只凍存保護劑,重新凍存細胞。 |
★由于細胞庫現有細胞類目多,為了不出現混亂錯誤,需要了解相關細胞價格及詳細資料直接call,對您造成的不便還請見諒!
★注:如運輸過程中導致細胞污染或者死亡,我們將無條件補發
收貨后十個工作日內有其他問題提供照片可半價重發
后,通過低溫保藏儲備一些細胞,以防支原體大面積來襲。如果支原體有抬頭的跡象,或常規檢測呈陽性結果,那么可靠的補救措施是扔掉所有培養物,清潔培養箱和超凈臺,一切從頭開始。當然,你得確保儲備的細胞是不含支原體的。
BEL-7404人肝癌細胞【已通過STR鑒定】
細胞英文(簡稱):BEL-7404
細胞名稱:BEL-7404人肝癌細胞【已通過STR鑒定】
背景資料
收到細胞,請查看瓶子是否有破裂,培養基是否漏出,是否渾濁,如有請盡快和我們聯系。如包裝完好,取出25cm2培養瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,在顯微鏡下觀察細胞形態是否正常,細胞的貼壁情況以及細胞密度,然后放入37℃,5%CO2細胞培養箱中靜置2-3小時,以穩定細胞狀態。
細胞來源:ATCC
代次:P3
規格:T25
細胞數:1x10^6 cells
組織來源:肝癌
BEL-7404人肝癌細胞【已通過STR鑒定】形態:貼壁;上皮細胞樣
細胞活力:95%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
細胞檢測:細胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌
培養條件:DMEM(高糖) +10% FBS;37℃,5% CO2
傳代方法:*建議1:2-1:3 兩天換液一次
凍存條件:90%FBS+10%DMSO
動物細胞培養,大致的步驟是這樣:
1.從動物胚胎或者一些剛出生的動物的器官或者組織上取得細胞,配制成細胞懸浮液.把細胞液放到培養瓶中,在培養箱里培養--------原代培養.
但是,不要以為這樣就能一直無限培養下去.
因為BEL-7404人肝癌細胞【已通過STR鑒定】在那個瓶壁上生長的時候,如果大量增殖,細胞之間會彼此相碰,細胞細胞就會停止分裂增殖,出現一種接觸抑制.
2.我們為了它們能繼續增殖,就用胰蛋白酶再把它們分開,然后再配制成細胞懸浮液,分開裝到好幾個瓶子里繼續培養--------傳代培養.